Če obstaja sum na Cushingov sindrom, bo veterinar izvedel preiskave krvi za potrditev diagnoze. Prav tako se priporoča izvedba rutinskih preiskav krvi za oceno splošnega stanja psa.
Koncentracija kortizola v krvi tekom dneva zelo niha, tako pri zdravih psih, kot tudi pri psih s Cushingovim sindromom. Iz tega razloga diagnoze ni mogoče potrditi z enim samim merjenjem kortizola. Dve preiskavi, ki se najpogosteje uporabljata za potrditev diagnoze sta, test supresije z nizkim odmerkom deksametazona in ACTH stimulacijski test. Morda bo potrebno izvesti oba testa.